孔徑是描述硅膠等色譜填料內(nèi)部孔隙大小的關(guān)鍵參數(shù)，指填料顆粒內(nèi)部孔隙通道的平均直徑或有效直徑，直接影響樣品分子能否進(jìn)入孔隙內(nèi)部與固定相發(fā)生作用，進(jìn)而左右色譜分離效果。

小分子分析中常用的孔徑為60-120 ?，以飛諾美經(jīng)典Luna系列為例，其便采用100 ?孔徑的填料顆粒，對(duì)應(yīng)的小分子截留分子量約為10000道爾頓。

表面積指色譜填料骨架材料的外表面及其孔的內(nèi)表面，增大表面積可直接提高載樣量，但需要注意的是，增大孔徑往往會(huì)伴隨表面積的減小。

以飛諾美Luna Omega系類(lèi)為例，Luna Omega硅膠顆粒采用專(zhuān)有熱處理全多孔顆粒技術(shù)，不僅能提升顆粒惰性、優(yōu)化顆粒形態(tài)、保證孔隙度一致性，還能通過(guò)該工藝消除微孔，進(jìn)一步增強(qiáng)色譜柱的柱效、惰性與重現(xiàn)性。和傳統(tǒng)全多孔硅膠相比，經(jīng)熱處理消除微孔的填料，還具備更低的表面積參數(shù)。

鍵合相覆蓋率指填料表面鍵合官能團(tuán)的密度，也叫表面覆蓋率，本質(zhì)是填料表面活性位點(diǎn)被鍵合官能團(tuán)占據(jù)的比例，直接影響色譜分離的選擇性、保留能力及穩(wěn)定性。

我們可以用 “開(kāi)學(xué)典禮座椅" 通俗理解：把填料顆粒比作操場(chǎng)，座椅是載體表面活性位點(diǎn)，坐了同學(xué)的座椅對(duì)應(yīng)被鍵合官能團(tuán)占據(jù)的位點(diǎn)，空置的座椅則對(duì)應(yīng)未被鍵合的游離硅烷醇。

一般來(lái)說(shuō)，表面覆蓋率較高的色譜柱，游離硅烷醇基濃度更低，化學(xué)穩(wěn)定性更強(qiáng)，不同色譜柱間的重現(xiàn)性也更優(yōu)，且材料的保留能力會(huì)隨覆蓋率提升而增強(qiáng)。

碳載量是固定相中碳元素占固定相總重量的百分比，其數(shù)值會(huì)隨表面覆蓋率和固定相中烴鏈長(zhǎng)度變化，烴鏈配體的碳載量通常在 5%-31% 區(qū)間。

它和鍵合相覆蓋率相關(guān)但側(cè)重不同：覆蓋率關(guān)注 “活性位點(diǎn)占用比例"，碳載量關(guān)注 “實(shí)際鍵合碳元素的總質(zhì)量占比"。在相同覆蓋率下，碳鏈越長(zhǎng)（如 C18＞C8＞C4），單條鏈含碳量越高，總碳載量也越高。

碳載量越高，填料基于疏水相互作用的保留能力越強(qiáng)，在反相色譜分析中，對(duì)疏水性物質(zhì)的保留時(shí)間也會(huì)相應(yīng)延長(zhǎng)。以核殼 Kinetex 的 5 款 C18 為例，因填料技術(shù)和表面修飾不同，其碳載量范圍在 9%-12% 之間，能為分析過(guò)程提供差異化的疏水性、氫鍵供受能力、離子交換作用力及物質(zhì)選擇性。